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PCR引物探针合成、修饰和标记
PCR 引物探针定制
siRNA/ gRNA 定制
基因合成/过表达/gRNA/shRNA质粒
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microRNA qPCR kits
品牌 货号 品名 规格 特性 价格
BioTNT CL-hsa-miR-4417 hsa-miR-4417 qPCR引物试剂盒 120T ¥580
¥450
BioTNT CL-hsa-miR-4418 hsa-miR-4418 qPCR引物试剂盒 120T ¥580
¥450
BioTNT CL-hsa-miR-4419a hsa-miR-4419a qPCR引物试剂盒 120T ¥580
¥450
BioTNT CL-hsa-miR-4419b hsa-miR-4419b qPCR引物试剂盒 120T ¥580
¥450
BioTNT CL-hsa-miR-4420 hsa-miR-4420 qPCR引物试剂盒 120T ¥580
¥450
BioTNT CL-hsa-miR-4421 hsa-miR-4421 qPCR引物试剂盒 120T ¥580
¥450
BioTNT CL-hsa-miR-4422 hsa-miR-4422 qPCR引物试剂盒 120T ¥580
¥450
BioTNT CL-hsa-miR-4423-3p hsa-miR-4423-3p qPCR引物试剂盒 120T ¥580
¥450
BioTNT CL-hsa-miR-4423-5p hsa-miR-4423-5p qPCR引物试剂盒 120T ¥580
¥450
BioTNT CL-hsa-miR-4424 hsa-miR-4424 qPCR引物试剂盒 120T ¥580
¥450
BioTNT CL-hsa-miR-4425 hsa-miR-4425 qPCR引物试剂盒 120T ¥580
¥450
BioTNT CL-hsa-miR-4426 hsa-miR-4426 qPCR引物试剂盒 120T ¥580
¥450
BioTNT CL-hsa-miR-4427 hsa-miR-4427 qPCR引物试剂盒 120T ¥580
¥450
BioTNT CL-hsa-miR-4428 hsa-miR-4428 qPCR引物试剂盒 120T ¥580
¥450
BioTNT CL-hsa-miR-4429 hsa-miR-4429 qPCR引物试剂盒 120T ¥580
¥450
BioTNT CL-hsa-miR-4430 hsa-miR-4430 qPCR引物试剂盒 120T ¥580
¥450
BioTNT CL-hsa-miR-4431 hsa-miR-4431 qPCR引物试剂盒 120T ¥580
¥450
BioTNT CL-hsa-miR-4432 hsa-miR-4432 qPCR引物试剂盒 120T ¥580
¥450
BioTNT CL-hsa-miR-4433a-3p hsa-miR-4433a-3p qPCR引物试剂盒 120T ¥580
¥450
BioTNT CL-hsa-miR-4433a-5p hsa-miR-4433a-5p qPCR引物试剂盒 120T ¥580
¥450
BioTNT CL-hsa-miR-4433b-3p hsa-miR-4433b-3p qPCR引物试剂盒 120T ¥580
¥450
BioTNT CL-hsa-miR-4433b-5p hsa-miR-4433b-5p qPCR引物试剂盒 120T ¥580
¥450
BioTNT CL-hsa-miR-4434 hsa-miR-4434 qPCR引物试剂盒 120T ¥580
¥450
BioTNT CL-hsa-miR-4435 hsa-miR-4435 qPCR引物试剂盒 120T ¥580
¥450
BioTNT CL-hsa-miR-4436a hsa-miR-4436a qPCR引物试剂盒 120T ¥580
¥450
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 BioTNT microRNA QPCR 实验相关产品订购指南:

 逆转录和QPCR实验:

BioTNT 针对microRNA的特点,升级了microRNA 检测试剂盒;

试剂盒原理:特异性茎环法microRNA 检测试剂盒, 新的试剂盒相对老款microRNA试剂盒,操作更加简便,灵敏度更高!

新旧款试剂盒比较:

 

新款

老款

新款试剂盒分为三部分

老款试剂盒分为四部分

逆转录和PCR mix 为一步法(120T *3*10ul逆转录+qPCR

有专门的逆转录试剂盒(120T;和PCR mix3ml

有目的引物试剂盒(足量)

有目的引物试剂盒(120T 逆转录茎环引物+360T qPCR引物)

赠送内参引物试剂盒(足量)

赠送内参引物试剂盒(120T 逆转录茎环引物+360T qPCR引物)

灵敏度高,可提高至少2个循环

灵敏度低

整个实验共1.5hr

整个实验共3hr

体系使用浓度不同,但引物试剂盒的浓度是按照老款试剂盒来提供的足量的引物;

 

 

您也可以单独购买:

BioTNT

A2010A005c  

microRNA专用一步法逆转录qPCR mix  

1ml

 

650

BioTNT

A2010A005c-5

microRNA专用一步法逆转录qPCR mix  

5ml

 

2600

 

1ml 可以进行100个样本10ul体系的逆转录和qPCR实验(单孔);

 

试剂盒中根据样本类型的不同,提供不同的内参选择:

组织/细胞: RNU6;

血清/血浆:mir-16-5p

 

备注:试剂盒不包含抽提部分,

以下所列的抽提方法提出的RNA 均可用于biotnt microRNA检测试剂盒。

1组织   我们推荐用磁珠法抽提试剂盒进行抽提:

品名

货号

方法学和功能

品牌

规格

报价

促销价格

BT Tissue RNA Kit(磁珠法动物组织RNA提取试剂盒)

BT0053-S

磁珠法

BioTNT

50T

767

590

BT Tissue RNA Kit(磁珠法动物组织RNA提取试剂盒)

BT0053-L

磁珠法

BioTNT

100T

1300

1000

Tissue RNA Kit(动物组织RNA提取试剂盒)磁珠法(升级版)

A2010A101

磁珠法

BioTNT

50T

2210

1700

3mm不锈钢研磨珠

A2010A0406

研磨

BioTNT

3mm*4150粒/瓶

128.7

99

 

备注:microRNA 的检测不能用普通的离心柱来抽提RNA;

 

2细胞: 

普通磁珠法细胞总RNA提取试剂盒性价比高;

微量Cell Total RNA Kit(微量细胞总RNA提取试剂盒)磁珠法 可以抽提低至10的三次方的细胞,灵敏度高,样本质量完整,适用于流式分选细胞的抽提,样本完整度符合二代测序等要求高的实验;

 

品名

货号

方法学和功能

品牌

规格

报价

BT Cell Total RNA Kit(磁珠法细胞总RNA提取试剂盒)

BT0055-S

磁珠法

BioTNT

50T

767

BT Cell Total RNA Kit(磁珠法细胞总RNA提取试剂盒)

BT0055-L

磁珠法

BioTNT

100T

1300

微量Cell Total RNA Kit(微量细胞总RNA提取试剂盒)磁珠法

A2010A104

磁珠法

BioTNT

50T

1911

 

3血清/血浆/全血的总RNA抽提

试剂盒适用于血清/血浆/全血的总RNA抽提;两者都可用于mRNA的检测和microRNA的检测;血清样本的microRNA检测仅需200ul,效果可以媲美大牌的专门的microRNA抽提试剂盒;

 

品名

货号

方法学和功能

品牌

规格

报价

促销价格

BT Blood RNA Kit(磁珠法血清、血浆、全血RNA提取试剂盒)

BT0052

磁珠法

BioTNT

50T

1300

1000

微量Blood RNA Kit(血清、血浆、全血RNA提取试剂盒)磁珠法(升级版)

A2010A102

磁珠法

BioTNT

50T

1911

1470

 

4其他类型样本:粪便/植物/细菌/真菌/石蜡样本

品名

货号

方法学和功能

品牌

规格

报价

促销价格

BT Stool RNA Kit(磁珠法粪便RNA提取试剂盒)

BT0056-S

磁珠法

BioTNT

50T

780

600

BT Stool RNA Kit(磁珠法粪便RNA提取试剂盒)

BT0056-L

磁珠法

BioTNT

100T

1430

1100

BT Fast Plant Total RNA Kit(磁珠法植物总RNA提取试剂盒)

BT0051-S

磁珠法

BioTNT

50T

780

600

BT Fast Plant Total RNA Kit(磁珠法植物总RNA提取试剂盒)

BT0051-L

磁珠法

BioTNT

100T

1430

1100

BT Bacteria/fungus RNA Kit(细菌、真菌RNA提取试剂盒)

BT0054-S

磁珠法

BioTNT

50T

780

600

BT Bacteria/fungus RNA Kit(细菌、真菌RNA提取试剂盒)

BT0054-L

磁珠法

BioTNT

100T

1430

1100

石蜡RNA抽提试剂盒(磁珠法)

A2010A103

磁珠法

BioTNT

50T

2540

1950

 

以上所列的抽提方法提出的RNA 均可用于biotnt microRNA检测试剂盒。

 

BioTNT 五年QPCR microRNA QPCR  检测倾情服务!  优质服务品质回报社会!

BioTNT 生物技术服务部自从2010年成立以来,承接了超过1000个QPCR microRNA 技术服务项目,积累了广泛的QPCR 定量检测的经验。
 
一、简介: 关于microRNA
     MicroRNAs(miRNAs)是一种小的内源性非编码RNA分子,大约由21-25个核苷酸组成。这些小的miRNA通常靶向一个或者多个mRNA,通过翻译水平的抑制或断裂靶标mRNAs而调节基因的表达。成熟的microRNA 的形成包含多个步骤。首先,microRNA 基因被转录成命名为pri-microRNA 的初级转录物;动物pri-microRNA的第一次剪切位于细胞核内,产生大小为70个核苷酸左右并能形成茎-环结构的microRNA 前体,称为pre-microRNA;第二次剪切位于细胞质中,pre-microRNA被剪切成21-25个核苷酸成熟的microRNA。
     MicroRNA 自从1993年首次被报道以来,现已经被发现了3000多种,存在于人类和所有的模式生物中。MicroRNA 通过与mRNA的3’ UTR 结合而介导翻译水平的调控,也可通过与mRNA结合的互补程度决定microRNA将以何种机制发生作用;完全的互补引起与RNAi类似的作用,不完全互补则导致翻译抑制作用。因此,研究microRNA对于深入探讨生命现象的本质,解释细胞行为和疾病发生机制,具有重要的理论意义;对于疾病的诊断、治疗和预防具有潜在的实际应用价值。

    关于microRNA:

图1,pre-microRNA 和 microRNA 示意图
 
MicroRNA由于长度太短,一般难以检测。
 
二、BioTNT miRNA qPCR Detection System 介绍
 
BioTNT 生物技术部推出了 miRNA qPCR Detection System , 是专门用于miRNA 定量检测的系统。该系统包括:
·                 miRNA检测试剂盒miRNA qRT-PCR Detection Kit:
  • 应用于miRNA的特异茎环逆转录系统、及其qPCR 反应特异miRNA的引物assay:
  • 特异性的茎环逆转录引物和qPCR检测上下游引物。

      

特点:

  • 1.   应用茎环逆转录引物进行逆转录,可以区分成熟的microRNA和premicroRNA;
    2.   应用BioTNT  miRNA qRT-PCR sybgreen Detection Kit,已经优化的适合特异茎环逆转录引物进行CDNA 合成的protocol,用于100个microRNA样本的已知第一链CDNA合成;
    3.   BioTNT 经验证的特异性茎环系统assay 可以提供您方便的实验方案;采用了100Tests的包装,方便您的实验;
     
    产品特征:
    ² 本方法可以采用经典的trizol法抽提得到的总RNA;
    ² 检测的特异性:独特的miRNA茎环逆转录引物的设计技术及其优化的反应体系避免了非特异性扩增、特别是Pre-miRNA的污染;
    ² 检测分辨率高:该系统能分辨单碱基差异的miRNA;
    ² 一站式解决方案:BioTNT不仅提供检测的试剂盒,还提供经验证的人源、小鼠源、大鼠源的特异性microRNA assay;
    ² 检测灵敏度高:可在低至pg级的总RNA中检测到特异表达的miRNA;
     
    质量说明
  • BioTNT  miRNA qRT-PCR sybgreen Detection Kit已包含有检测所需要的所有试剂, 客户仅需要提供RNA及BioTNT 特异性茎环系统assay即可进行miRNA检测;
  • 我们提供的BioTNT 特异性茎环系统assay建议同BioTNT  miRNA qRT-PCR sybgreen Detection Kit配套使用;
  • 我们承诺推出的每个BioTNT 特异性茎环系统assay都提供利用BioTNT  miRNA qRT-PCR sybgreen Detection Kit进行验证的报告,其报告内容包括验证流程、引物相应扩增曲线、融解曲线、及其推荐的反应条件, 同时还提供阳性的cDNA验证模板,客户可以参考此条件进行检测实验。

 

三、BioTNT QPCR microRNA 样本准备  
 
3.1 组织样本准备
 
  注意:BioTNT QPCR microRNA 检测的样本取样同Real time PCR的组织取样与保存:
1、 取动物的组织,动作要求迅速,尽量避免样本在环境中暴露太久;
2、 讲样本迅速放入无菌无酶的冻存管中,为保证质量,推荐选取Axygen,corning,nunc等国外品牌的冻存管;根据组织块的大小,确定RNA 抽提方式;如果组织块非常小,建议采用柱抽提试剂盒进行抽提( RNeasy Micro Kit(50) 74004 ),此时样本中不要加入trizol;如果组织块有100mg,可以采用trizol 法抽提总RNA的方式(RNA提取试剂盒(Trizol 法) A2010B0A01),进行样本的保存,在样本中加入1ml trizol 浸没样本;
3、 在冻存管上做好标记,尽量清晰易辨;在实验记录本上做好记录,尽量详细易查;
4、 将冻存管直接放入液氮中速冻;或加入1ml Trizol 到冻存管中,再放入液氮速冻;
5、 速冻2h 后,将冻存管从液氮转至-80度冰箱,可以保存6个月左右;
 
BioTNT QPCR microRNA 的细胞取样与保存
1、 悬浮细胞:500g 离心5min 取细胞,用PBS 清洗2-3遍,得细胞,并转至放入冻存管中;
2、 根据细胞量进行后续抽提方式的选择,如果细胞量大于5*10的5次方,可以采用trizol 方式进行总RNA 抽提,如果小于此量,建议采用Qiagen的柱式抽提( RNeasy Micro Kit(50) 74004 
);可以采用trizol 抽提的客户,可在样本中加入500ul Trizol 到冻存管中,吹打混匀(RNA提取试剂盒(Trizol 法) A2010B0A01);
3、 在冻存管上做好标记,尽量清晰易辨;在实验记录本上做好记录,尽量详细易查;
4、 将冻存管放入液氮速冻,2h 后,转至-80度冰箱,可以保存6个月左右;
 
样本运输:干冰运输
 
3.3  血清/血浆样本准备:
建议采用血浆样本,可以得到相对更好的实验结果。
使用抗凝管采集全血,并尽快进行血浆分离:1000g离心10分钟,分离血浆和细胞组分。(注意:血浆收集应使用抗凝管,抗凝剂可以用柠檬酸钠或EDTA等,但一定不要使用肝素抗凝,因为肝素对后续实验有较大影响。)将采集好的血浆转移至单独的冻存管,按照每400-500ul/管分装好。
短期保存,可放入-20℃或-70℃冰箱。长期保存,请放入液氮。
 
3.4  全血样本准备:
请按照实际使用的收集方法,如注射器收集或真空收集管等,参考相应的厂商提供产品说明进行操作。
采集好全血,将采集好的全血转移至单独的冻存管,按照每500ul/管分装好。
短期保存,可放入-20℃或-70℃冰箱。长期保存,请放入液氮。
 
 
3.5  石蜡样本准备:
石蜡切片,至少三片;或者提供石蜡块,常温保存。
 
 
BioTNT QPCR microRNA 样本抽提
 

 1组织   我们推荐用磁珠法抽提试剂盒进行抽提:

品名

货号

方法学和功能

品牌

规格

BT Tissue RNA Kit(磁珠法动物组织RNA提取试剂盒)

BT0053-S

磁珠法

BioTNT

50T

3mm不锈钢研磨珠

A2010A0406

研磨

BioTNT

3mm*4150粒/瓶

BT Cell Total RNA Kit(磁珠法细胞总RNA提取试剂盒)

BT0055-S

磁珠法

BioTNT

50T

BT Blood RNA Kit(磁珠法血清、血浆、全血RNA提取试剂盒)

BT0052

磁珠法

BioTNT

50T

BT Stool RNA Kit(磁珠法粪便RNA提取试剂盒)

BT0056-S

磁珠法

BioTNT

50T

BT Fast Plant Total RNA Kit(磁珠法植物总RNA提取试剂盒)

BT0051-S

磁珠法

BioTNT

50T

BT Bacteria/fungus RNA Kit(细菌、真菌RNA提取试剂盒)

BT0054-S

磁珠法

BioTNT

50T

石蜡RNA抽提试剂盒(磁珠法)

A2010A103

磁珠法

BioTNT

50T

 检测使用的仪器

 进行检测使用的主要仪器为QPCR, BioTNT 使用thermofisher新款的实时荧光定量PCR系统QS3进行microRNA的QPCR 检测。

仪器图片:

 
 
 
五、BioTNT QPCR microRNA 检测标准服务流程
 
BioTNT  microRNA 检测技术服务标准流程:

1)客户提供样本(组织,细胞,血清等样本或者RNA),请参照取样与保存;

2)   客户提供检测指标;

3)   与客户协商内参的选取(对应种属的内参,组织/细胞等样本用RNU6,血清/血浆用 mir-16-5p);

抽提RNA;

采用 BioTNT  PCR miRNA qPCR Detection System;

4)   客户样本验证进行抽提,RT-QPCR 检测,验证系统是否好用;

5)   抽提得到RNA约20ul-50ul,可以进行50+ microRNA检测,80+ mRNA检测;

6)   客户的大批量样本进行处理,抽提和实验。

7)   大批量样本RT- qPCR实验;使用仪器为:ABI 公司的QS3;

8)   靶基因表达水平结果分析,数据分析方法为:delta delta CT 法;也可以采用相对定量的标准曲线法;

9)   提供客户实验报告;包括方法,材料,设备,原始数据和计算数据的成套材料;

 
 
 
六、BioTNT real time PCR 检测技术服务收费标准

☆ 实验步骤
 
组织或细胞总RNA抽提   80元(trizol抽提microRNA,一个组织或细胞标本);
离心柱式抽提费用细胞/组织 120元/样;
血清/血浆 140元/样;
石蜡切片 160元/样

 特异性逆转录+目的基因实时定量PCR    数据分析   双重复数据120元(一个标本一个指标),三重复数据160元 (内参同样按照目的基因收费)

引物等费用涵盖在这里面;

 如需制备标准曲线,收取标准曲线制备费用200元/一个基因

 一次取样,超过3个,免费;小于等于3个样品, 上海市区收取20元/次的取样费用;上海郊区,不上门取样;

外地邮寄费用自理;

☆ 全套技术服务
您只需提供组织或细胞标本,我们为您完成RNA抽提,cDNA制备,实时定量PCR,标准曲线制备及数据分析的所有步骤。
 

【您只需提供】

◇ 组织
◇ 或,高浓度的Total RNA
◇microRNA 名称
 
【我们向您提供】 
◇ 实验材料、仪器、方法、步骤
◇ 供发表的引物序列、扩增曲线、熔解曲线
◇ 原始实验数据和计算好的正式实验数据
◇ 免费实验培训、技术支持
 
 

 

 

资料名称 资料描述 下载
A2030A001microPNA逆转录试剂盒(茎环法) A2030A001microPNA逆转录试剂盒(茎环法) 请先登录
A2030A002 microRNA PCR premix 说明书 A2030A002 microRNA PCR premix 说明书 请先登录
A2030A003 microRNA qRT-PCR syb kit-2018说明书 A2030A003 microRNA qRT-PCR syb kit-2018说明书 请先登录
Manual BioTNT 茎环法microRNA qRT-PCR 试剂盒使用说明 Manual BioTNT 茎环法microRNA qRT-PCR 试剂盒使用说明 请先登录
serum miRNA文献2 Circulating microRNAs as stable blood-based serum miRNA文献2 Circulating microRNAs as stable blood-based 请先登录
serum miRNA文献1Characterization of microRNAs in serum a novel class of serum miRNA文献1Characterization of microRNAs in serum a novel class of 请先登录
PCR客户使用实验报告(mRNA) PCR客户使用实验报告(mRNA) 请先登录
数据报告说明——qPCR篇 下载BioTNT的PCR数据后,如何解读并运用数据进行统计呢?
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Analysis of Relative Gene Expression Data Analysis of Relative Gene Expression Data Using Real-Time Quantitative PCR and the 22DDCT Method, 相对定量经典文献 请先登录
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